RealPAGE凝膠蛋白電泳試劑盒
RealPAGE Gel Protein Electrophoresis Kit
● 產品貨號及規格：
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貨號
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名稱
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組份貨號
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組份名稱
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規格
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RTD6126-10
(10板膠)
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RTD6126-0508-01
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8% RealPAGE凝膠預混液
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RTD6126-05-01
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5%濃縮膠預混液
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15 ml*
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RTD6126-08-01
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8%分離膠預混液
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50 ml*
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RTD6126-0510-01
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10% RealPAGE凝膠預混液
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RTD6126-05-01
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5%濃縮膠預混液
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15 ml
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RTD6126-10-01
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10%分離膠預混液
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50 ml
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RTD6126-0512-01
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12% RealPAGE凝膠預混液
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RTD6126-05-01
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5%濃縮膠預混液
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15 ml
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RTD6126-12-01
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12%分離膠預混液
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50 ml
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RTD6126-0515-01
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15% RealPAGE凝膠預混液
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RTD6126-05-01
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5%濃縮膠預混液
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15 ml
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RTD6126-15-01
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15%分離膠預混液
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50 ml
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TM1230-03
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10×Tris-MOPS-SDS緩沖液
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500 ml (干粉)
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10% APS/TEMED
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5ml/0.5ml
xg
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RTD6126-50
(50板膠)
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RTD6126-0508-02
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8% RealPAGE凝膠預混液
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RTD6126-05-02
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5%濃縮膠預混液
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80 ml*
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RTD6126-08-02
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8%分離膠預混液
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250 ml*
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RTD6126-0510-02
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10% RealPAGE凝膠預混液
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RTD6126-05-02
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5%濃縮膠預混液
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80 ml
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RTD6126-10-02
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10%分離膠預混液
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250 ml
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RTD6126-0512-02
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12% RealPAGE凝膠預混液
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RTD6126-05-02
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5%濃縮膠預混液
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80 ml
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RTD6126-12-02
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12%分離膠預混液
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250 ml
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RTD6126-0515-02
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15% RealPAGE凝膠預混液
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RTD6126-05-02
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5%濃縮膠預混液
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80 ml
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RTD6126-15-02
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15%分離膠預混液
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250 ml
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TM1230-02
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10×Tris-MOPS-SDS緩沖液
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2×1升(干粉)
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10% APS/TEMED
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5ml/0.5ml
xg
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* 制備一塊1 mm8cm×8cm凝膠需要分離膠預混液約4.5 ml，濃縮膠預混液約1.5 ml。
RTD6126-10每套溶液可以配制至少10板凝膠; RTD6126-50每套溶液可以配制至少50板凝膠;
● 產品簡介：
該產品利用聚丙烯酰胺凝膠電泳原理，采用合理設計的預混合配方和配制流程，可在20-30分鐘內配制得到高質量的聚丙烯酰胺凝膠，用于變性和非變性蛋白凝膠電泳。本產品提供四種常用分離膠濃度8%、10%、12%和15%，可以滿足絕大多數蛋白電泳需求。
● 特點：
1. 方便：分離膠和濃縮膠的制備只需用預混液加上APS和TEMED即可；
2. 快速：20-30分鐘內即可制備好凝膠。
3. 安全：預混液，不用接觸有毒粉末。
4. 穩定：獨特pH中性預混液配方，凝膠4℃穩定貯存一年。
● 貯存： 4℃貯存。有效期一年。
● 使用說明：
一 凝膠制備：
以下程序以制備一塊1 mm厚，大小8cm×8cm凝膠為例，實際操作按照使用膠板規格調整試劑用量。
1．參照凝膠模具說明書，裝配好凝膠模具。
2. 根據下表參考選擇合適的凝膠濃度
不同濃度的SDS-PAGE分離膠的最佳分離范圍
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SDS-PAGE分離膠濃度
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最佳分離范圍
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8%
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30-90kD
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10%
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20-80kD
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12%
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12-60kD
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15%
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10-40kD
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3．分離膠配制：
參照下表，在凝膠模具中灌入分離膠溶液（凝膠液加至距前玻璃板頂端約1.5 cm或距梳齒約0.5 cm即可），然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-2 cm的水層，使凝膠表面保持平整；靜置10-15分鐘（25℃），待分離膠和水層之間出現一個清晰的界面后，說明凝膠已聚合；去除覆蓋在分離膠上的水層。
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分離膠配制
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濃縮膠配制
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分離膠預混液
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4.5 ml
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/
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5%濃縮膠預混液
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/
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1.5 ml
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TEMED
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4.5 μl
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1.5 μl
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10% APS
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45 μl
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15 μl
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4．濃縮膠配制：
將濃縮膠溶液加至分離膠的上面，直至凝膠溶液到達前玻璃板的頂端；將梳子插入凝膠內，避免產生氣泡；靜置15-20分鐘（25℃），等待濃縮膠聚合。
注：凝膠的聚合時間與環境溫度有關。夏天溫度較高時，聚合較快；冬天氣溫低時，聚合時間會延長�？梢愿鶕h境溫度的不同調節APS的加入量。
二 電泳：
1. Tris-MOPS-SDS電泳緩沖液配制：
10×Tris-MOPS-SDS緩沖液 溶液型 配制方法：
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貨號
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10×Tris-MOPS-SDS緩沖液
干粉型
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10×Tris-MOPS-SDS緩沖液
溶液型 配制量
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TM1230-03
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500ml 干粉
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加超純水，徹底溶解后定容至 500 ml
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TM1230-02
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1升 干粉
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加超純水，徹底溶解后定容至 1000 ml
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注： = 1 \* GB3 ① 10×Tris-MOPS-SDS緩沖液溶液 4℃避光貯存，如溶液變黃，表明試劑失效，不能使用。
= 2 \* GB3 ② 本產品提供10×Tris-MOPS-SDS電泳緩沖液，適用于變性蛋白電泳。如要進行非變性電泳，請自行配制不含SDS的Tris-MOPS電泳緩沖液（見緩沖液配方）
電泳前，按照下表配制1×Tris-MOPS-SDS緩沖液
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1×Tris-MOPS-SDS緩沖液配制量
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400 ml
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1000 ml
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10×Tris-MOPS-SDS緩沖液
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40 ml
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100 ml
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超純水
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360 ml
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900 ml
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注：400 ml 1×Tris-MOPS-SDS緩沖液可以完成一次電泳。
2. 凝膠凝固好后，上樣，電泳。
電泳條件
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電泳緩沖液
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穩壓電泳
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起始電流
(一板膠)
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結束電流
(一板膠)
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電泳時間
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1×Tris-MOPS-SDS緩沖液
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140 V
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90-120 mA
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30-45 mA
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45-70分鐘
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注： = 1 \* GB3 ① 本產品使用Tris-MOPS-SDS緩沖液或Tris-MES-SDS緩沖液，不適合用Tris-甘氨酸-SDS緩沖液電泳。
= 2 \* GB3 ② 1×Tris-MOPS-SDS緩沖液可以回收利用2-3次。
三 緩沖液配方：
1 10x Tris-MOPS-SDS緩沖液 (1 L) (Cat No: TM1230-02)
組分濃度：0.5 MTris,0.5 MMOPS, 1% SDS，10mMEDTA 2Na，50mMNaHSO3
Tris base 60.6 g
MOPS 104.6 g
SDS 10 g
EDTA Na 3 g
NaHSO3 5.2 g
用滅菌ddH2O定容至1 升
Do not adjust the pH (~pH 7.7)
2 10x Tris-MOPS緩沖液 (1 L) (Cat No: TM1240-02)
組分濃度：0.5 MTris,0.5 MMOPS，10mMEDTA 2Na
Tris base 60.6 g
MOPS 104.6 g
EDTA Na 3 g
用滅菌ddH2O定容至1 升
Do not adjust the pH (~pH 7.7)
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